Puntos clave
- Las pruebas de amplificación de ácidos nucleicos (NAAT) pueden detectar infecciones por el virus del dengue durante los primeros 7 días de enfermedad.
- El ensayo rRT-PCR DENV-1-4 de los CDC es una prueba de amplificación de ácidos nucleicos (NAAT) para la detección y tipificación de los virus del dengue.
- El ensayo rRT-PCR DENV-1-4 de los CDC está aprobado para el diagnóstico del dengue por la Administración de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos (FDA) y se distribuye a los laboratorios.
Características del ensayo multiplex rRT-PCR DENV-1-4 de los CDC
El ensayo rRT-PCR DENV-1-4 de los CDC es una prueba de amplificación de ácidos nucleicos (NAAT) para la detección y tipificación del virus del dengue en casos presuntos y sintomáticos de dengue. Este ensayo detecta los serotipos 1, 2, 3 o 4 del virus del dengue a partir de suero o plasma extraídos de pacientes humanos.
El kit de ensayo multiplex rRT-PCR DENV-1-4 de los CDC incluye:
- Cebadores oligonucleótidos y sondas de hidrólisis de doble marcado (Taqman®) para la detección cualitativa in vitro de los serotipos 1, 2, 3 o 4 del virus del dengue a partir de suero o plasma recolectados de pacientes humanos con signos y síntomas compatibles con dengue (leve o grave).
- Mezcla de virus de control positivo, que consta de DENV-1 Haw, DENV-2 NGC, DENV-3 H87 y DENV-4 H241 inactivados por calor.
- El control de muestra humana (HSC) es un material de células humanas cultivadas no infecciosas que proporciona una señal positiva en el ensayo y demuestra una recuperación exitosa del ARN, así como la integridad del reactivo de extracción de ARN.
El ensayo multiplex rRT-PCR DENV-1-4 de los CDC se puede realizar en formato singleplex (cada serotipo de DENV se detecta en una reacción independiente) o en formato multiplex (los cuatro serotipos de DENV se analizan en la misma reacción). Estos dos formatos proporcionan la misma sensibilidad.
Uso previsto de los CDC
El ensayo multiplex rRT-PCR DENV-1-4 de los CDC está diseñado para usarse en un instrumento de PCR en tiempo real Applied Biosystems (ABI) 7500 Fast Dx para los siguientes fines:
- Diagnóstico del dengue en suero o plasma recolectado de pacientes con signos y síntomas compatibles con dengue.
- Identificación de los serotipos 1, 2, 3 o 4 del DENV a partir del ARN viral en suero o plasma (citrato de sodio) recolectado de pacientes humanos con dengue.
- Proporcionar información epidemiológica para la vigilancia de los virus del dengue en circulación.
- Este ensayo debe utilizarse en muestras recolectadas durante los primeros 7 días después del inicio de los síntomas del paciente.
Tenga en cuenta
El ensayo multiplex rRT-PCR DENV-1-4 de los CDC no está aprobado para la detección de donantes de sangre o plasma.
Interpretación de resultados
- Los resultados positivos del ensayo multiplex rRT-PCR DENV-1-4 de los CDC indican una infección actual por dengue confirmada.
- Los resultados negativos obtenidos con esta prueba no descartan el diagnóstico de dengue.
- Se recomienda la prueba de IgM como parte del algoritmo de prueba y puede confirmar el diagnóstico.
- Se recomienda la prueba de IgM como parte del algoritmo de prueba y puede confirmar el diagnóstico.
- Si la muestra de sangre se toma de un paciente 7 días o más después del inicio de los síntomas, se prefiere realizar una prueba serológica para detectar anticuerpos IgM contra DENV.
- Los anticuerpos IgM contra el virus del dengue pueden permanecer detectables durante 3 meses o más después de la infección.
- Los anticuerpos IgM contra el virus del dengue pueden permanecer detectables durante 3 meses o más después de la infección.
Distribución de ensayos
El ensayo multiplex rRT-PCR DENV-1-4 de los CDC se distribuye a laboratorios con personal capacitado y con experiencia en procedimientos estandarizados de pruebas de diagnóstico molecular y diagnóstico viral, y con equipos de bioseguridad y contención adecuados. Las solicitudes se pueden enviar a DenguePCROrdering@cdc.gov.
Información para laboratorios en los Estados Unidos
Materiales proporcionados en el ensayo multiplex rRT-PCR DENV-1-4 de los CDC
- Caja 1: Kit de detección (conjuntos de cebador y sonda)
- Caja 2: Kit de control positivo (una mezcla de estándares DENV-1, -2, -3 y -4 inactivados por calor)
- Caja 3: Control de extracción de muestras humanas (HSC)
Consulte el prospecto para los Estados Unidos aquí (solo versión impresa) [PDF – 53 páginas]
Kit: opciones de mezcla maestra de enzimas para rRT-PCR
Reactivo: Invitrogen SuperScript™ III Platinum® Reactions Sistema de RT-PCR cuantitativa de un solo paso (sin Rox)*
- Cantidad – 100 reacciones
- N.° de catálogo: 11732-020
- N.° de catálogo: 11732-020
- Cantidad – 500 reacciones
- N.° de catálogo: 11732-088
- N.° de catálogo: 11732-088
Kit: opciones de kit de purificación de ácidos nucleicos
Reactivo: Kit Qiagen QIAamp® DSP Viral RNA Mini e instrumento Qiagen QIAcube**
- Cantidad – 50 extracciones
- N.° de catálogo: 71904 y 9001292
- N.° de catálogo: 71904 y 9001292
Reactivo: Kit de aislamiento de ácidos nucleicos totales Roche MagNA Pure LC *
- Cantidad – 192 extracciones
- N.° de catálogo: 03 038 505 001
- N.° de catálogo: 03 038 505 001
*El rendimiento de la prueba de ensayo multiplex rRT-PCR DENV-1-4 de los CDC requiere que solo se utilicen lotes de reactivos auxiliares calificados con el dispositivo en los Estados Unidos. Cualquier lote que no esté específicamente calificado por la División de Dengue de los CDC para su uso con el ensayo multiplex rRT-PCR DENV-1-4 de los CDC no es válido para su uso con este dispositivo y puede afectar el rendimiento del dispositivo.
** El minikit Qiagen QIAamp® DSP Viral RNA (n.° de cat. 71904) se produce de acuerdo con las Buenas Prácticas de Manufactura (BPM). Estos kits de extracción de ARN se pueden utilizar de forma manual o en combinación con el instrumento QIAcube (n.° de cat. 9001292).
Información sobre el ensayo multiplex rRT-PCR DENV-1-4 de los CDC para laboratorios internacionales
Materiales proporcionados en el ensayo multiplex rRT-PCR DENV-1-4 de los CDC
- Caja 1: Kit de detección (conjuntos de cebador y sonda)
- Caja 2: Kit de control positivo (una mezcla de estándares DENV-1, -2, -3 y -4 inactivados por calor)
- Caja 3: Control de extracción de muestras humanas (HSC)
Consulte el prospecto internacional aquí (solo versión impresa) [PDF – 51 páginas]
Información de contacto, pedidos y asistencia del producto
Para obtener asistencia técnica y de productos, así como para obtener el ensayo multiplex rRT-PCR DENV-1-4 de los CDC y una lista de reactivos auxiliares calificados, comuníquese directamente con el equipo de asistencia de la División de Dengue de los CDC.
Para realizar pedidos y recibir asistencia técnica, envíe un correo electrónico a DenguePCROrdering@cdc.gov.
Incluya la siguiente información en su mensaje:
- Nombre y dirección del laboratorio
- Persona de contacto calificada
- Número de teléfono
- Dirección de correo electrónico
- Dirección de envío